开题报告内容:(包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述,不少于2000字)
一丶课题背景
胰腺癌的恶性程度极高,在早期很难被诊断和治疗,其发病率和死亡率几乎相当,近几年来备受人们的关注。OSMR作为一种受体与癌症细胞的转移有着密不可分的关系,具有促进细胞侵袭性转移和上皮-间质转化的能力。这种特性使得癌细胞快速逃离疾病的原发部位,系统地扩散,在继发部位发生转移,最终导致疾病的恶化。本课题针对OSMR研究其对促进胰腺癌迁移增殖的机制进行深入研究。
二丶课题目的
探究OSMR与胰腺癌迁移增殖的作用机制,研究OSMR信号通路中有效的靶点及其分子机制,为胰腺癌找到新的防治策略和治疗靶点。
三丶研究方法及内容
- 构建OSMR过表达质粒
从NCBI上查找OSMR基因型序列,利用获取的mRNA在Primer上设计cDNA扩增引物并对得到的目的基因PCR扩增。双酶切扩增基因与空载质粒以及后续的连接。对连接产物进行转化筛选阳性克隆。
- 过表达OSMR转染质粒,转染到pac02(小鼠胰腺导管腺癌细胞)检测相关物质变化水平,利用Wstern Blotting检测OSMR抗体蛋白浓度。
- 色谱检测jak、sda3浓度变化水平。Transwell小室法检测Panc02 迁移和侵袭能力,Western blot检测EMT指标,分析OSMR抗体阻断信号通路机制
四丶工作安排
1.掌握检测癌细胞迁移的实验方法,如transwell、划痕等实验;
2.3-4月完成开题报告;
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