DT-13抗人结肠癌作用的研究
结肠癌（CRC）是世界上最常见的胃肠道肿瘤之一，是威胁人类生命健康的一类恶性疾病，其发病率与死亡率均很高，排最常见肿瘤第三位。男性癌症发病率中结肠癌仅次于肺癌和前列腺癌，而女性癌症发病率中其仅次于肺癌和乳腺癌。截止2014年，我国结肠癌每年新增病例高达40万，全球每年新增病例约1000多万。结肠癌有多种发病原因，其中最重要的诱发因素是饮食，有资料表明，高脂肪、高蛋白和低纤维的饮食可使结肠癌发病率上升。近年来随着经济的发展，人饮食结构及习惯有所改变，我国结肠癌发病率呈逐年上升趋势，严重威胁国人的生命和健康[1-3]。
目前治疗结肠癌的主要手段是手术和化疗，但不良反应多，因此寻找并研究有效抗结肠癌治疗药物意义重大。而天然药物治疗肿瘤的副作用相对较少，从天然药物中寻找有效的抗肿瘤活性成分已成为当今研究的热点，有不少研究者已从各种天然植物中发现抗结肠癌活性成分，如半枝莲提取物（ESB）[2]、白花蛇舌草提取物（EHDW）[3]等。而我们的前期研究表明，短葶山麦冬皂苷（DT-13）也具有抗结肠癌作用。
短葶山麦冬产于福建仙游地区和湖北襄阳地区，可作为麦冬的替代品入药，具有降血糖、抗氧化、抗衰老及抗心肌缺血、抗肿瘤等作用。短葶山麦冬中主要含有甾体皂苷类、萜类、酰胺生物碱类、脂肪酸类等化合物，其主要活性成分为皂苷类化合物，即短葶山麦冬皂苷（DT-13），是短葶山麦冬须根中含量最高的活性成分，具有较明确的抗肿瘤转移、抗炎、增强免疫等多种药理活性，具有广阔的应用前景。
DT-13可作用于肿瘤细胞，抑制其黏附、侵袭和迁移，还可影响肿瘤微环境，通过抑制肿瘤间质成纤维细胞，抑制肿瘤细胞的黏附及抑制内皮细胞管腔形成，多方面发挥抑制肿瘤转移作用。同时，DT-13还具有调节免疫、抗炎、抗血栓等药理活性，利于肿瘤的综合治疗。而体内外实验得出的DT-13高效低毒的特性[4]，使其更具开发成为抗肿瘤新药的潜力。
已有研究表明，DT-13对肺癌细胞A549、胃癌细胞BGC-823及乳腺癌细胞MDA-MB-435[5]等肿瘤细胞具有抑制作用。而我们的前期研究结果显示，DT-13对人结肠癌细胞株HCT-116、HCT-15、HCT-29等也均有显著的生长抑制作用，但至今其抗肿瘤作用机制仍未完全阐明，因此，继续深入研究DT-13的抗结肠癌作用机理，可为其在结肠癌治疗应用中提供参考依据。本实验便以此为目的主要研究DT-13对结肠癌细胞凋亡及周期的影响。
细胞凋亡（apotosis），又叫程序性细胞死亡（programmed cell death，PCD），指细胞在发育和形态建成中，出现的一种不同于细胞坏死的正常生理死亡过程，具有高度保守性。
细胞凋亡包括3个时期：一是定型期，靶细胞接到死亡指令，开始程序死亡；二是实施期，细胞内出现一系列的形态和生化变化，如细胞核凝集、细胞缩小、形成膜泡、微绒毛丧失、染色体DNA降解、形成以核小体长度为单位的DNA片段等；三是吞噬期，凋亡小体被周围的吞噬细胞消化吞噬，凋亡完成。
在哺乳动物细胞凋亡过程中，有多种基因和蛋白起着非常重要的作用，如Caspase（半胱天冬氨酸酶）、Bcl-2蛋白家族、p53蛋白、survivin蛋白等，而其细胞凋亡机制主要有两种，为死亡受体途径（Fas途径）和线粒体途径[6-7]。
细胞凋亡是一种自发、主动的细胞死亡过程，是生物体维持细胞数量相对稳定的固有机制，而肿瘤则是一种细胞凋亡过少，增殖过多的疾病，若能抑制肿瘤细胞的增殖并诱导其凋亡，则有可能使肿瘤细胞停止生长，达到肿瘤治疗的目标。
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