一、课题解决的问题
H7N9是禽流感的一种亚型。所有人类的流感病毒都可以引起禽类流感,但不是所有的禽流感病毒都可以引起人类流感,禽流感病毒中,H3、H5、H7、H9可以传染给人,其中H5为高致病性。H3为人犬共患,依据流感病毒特征可分为HxNx共135种亚型,H7N9亚型禽流感病毒是其中的一种,既往仅在禽间发现,未发现过人的感染情况。这个病毒的生物学特点、致病力、传播力,还没有依据进行分析判断。H7N9型禽流感是全球首次发现的新亚型流感病毒,尚未纳入我国法定报告传染病监测报告系统,并且至2013年4月初尚未有疫苗推出。因此,研究治疗H7N9的药物和安全有效的疫苗成为研究热点。
本课题旨在在大肠杆菌中初步表达了H7N9病毒的重组蛋白,重组蛋白质经亲和层析得到了部分纯化。纯化后的蛋白可用于功能研究与疫苗研制,同时也是研究H7N9病毒蛋白质结构与功能的必需环节。
二、研究方法和技术路线
1.制备感受态细胞 转化 筛选 菌种保存
2. 接种 扩大 诱导 离心 超声破碎细胞 离心 抽滤粗蛋白液
抽滤蛋白胶混合液 洗杂蛋白 洗目的蛋白 胶回收 收蛋白
总体实验步骤为先提取质粒,转入感受态细胞,表达出重组蛋白,再利用超声波破碎细胞,通过亲和层析的方法达到纯化目的。
三、论文课题研究进度安排
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