开题报告内容：（包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述，不少于2000字）
- 选题的背景和意义
血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF），是一种高度特异性的促血管内皮细胞生长因子，具有促进血管通透性增加、细胞外基质变性、血管内皮细胞迁移、增殖和血管形成等作用。
人源抗血管内皮生长因子（VEGF）通过与血管内皮细胞相应的受体结合，刺激血管内皮细胞的增殖和迁移，诱导形成新生血管,使肿瘤持续生长。抗VEGF单克隆抗体通过中和VEGF因子，阻断其与内皮细胞表面VEGF受体结合，从而抑制内皮细胞的增殖与迁移,因此，抗VEGF抗体成为抗肿瘤血管治疗的重要研究方向．这类新药可通过阻断微血管的形成和生长达到抑制肿瘤细胞生长或维持肿瘤处于休眠期的目的。
近些年随着生物化工行业快速发展,许多微生物发酵技术也得到了广泛的应用。利用微生物发酵技术主要目的是生产微生物代谢的产物,从而进行二次加工人类所需要的产品。不同的微生物所需要的发酵环境各不相同，找到适宜的微生物生长环境,有利于提高产物的产量。
- 文献综述
通过优化密码子获得带有信号肽的人源抗血管内皮生长因子（VEGF）抗体的重链和轻链DNA序列，分别构建表达载体pcDNA—VEGFH和pcDNA—VEGFV，将表达载体共转染HEK—293细胞后，与C6胶质瘤细胞共培养，并将所得蛋白进行分离纯化。步骤如下：
1.设计并优化抗VEGF抗体重链及轻链基因序列。
2.构建表达载体。
3.VEGF抗体大量表达特性。将pcDNA－VEGFH和pcDNA－VEGFV表达载体共转染HEK－293Ｆ细胞，用SDS－PAGE方法检测不同时间蛋白表达水平。
4.重组基因表达产物活性检测。
5.VEGF抗体分离纯化及检测。
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