课题来源:自拟课题课题依据:肿瘤转移是引起肿瘤患者死亡的主要原因。
它主要包括以下几个步骤:原发灶的肿瘤细胞发生上皮间质转化获得运动能力并侵袭细胞基质,浸润周围组织后进入淋巴和血液系统,通过血流运输到达远处器官并穿出血管,在远处器官中蛰伏,等待时机生长从而形成转移灶。
尽管转移过程十分复杂,参与的分子信号和细胞元件较多,但是通过药物干预其中的某一环节就有可能抑制肿瘤的侵袭和抑制。
LW-216是汉黄芩素的衍生物,前期研究结果发现汉黄芩素的衍生物,前期研究结果发现汉黄芩素能抑制乳腺癌、黑色素瘤等肿瘤的侵袭与转移,这表明LW-216也可能具有抗肿瘤转移的活性。
因此,本课题研究了LW-216对乳腺癌细胞体内侵袭与转移的作用,并且揭示了LW-216的分子机制。
主要解决的问题:1、MTT实验活细胞内的线粒体脱氢酶能将MTT还原为蓝紫色的结晶甲瓒,DMSO将其溶解,溶解液颜色的深浅与活细胞数呈正比,据此可求出细胞存活率,死细胞则无此作用。
实验方法:乳腺癌细胞接种至96孔板,贴壁生长后,加入不同浓度的TNF-alpha;和汉黄芩苷LW-216。
2448 h后,每孔加入20 mu;l 5 mg/ml MTT溶液,避光放置于37 ℃培养箱4 h。
弃去上清溶液,板底甲瓒加100 mu;l DMSO溶解,板式摇床震荡,沉淀溶解均匀。
酶免疫检测仪在570 nm波长下,测量吸光度(OD 值)。
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