酵母来源烟酰胺核糖激酶的克隆表达与优化文献综述

 2023-04-22 15:57:32

文献综述

引言基因工程技术是伴随着分子生物学,遗传学,生物化学和微生物学研究领域的一系列重大突破而兴起的,基因工程是指在分子水平上按照人们的设计方案将DNA片段(目的基因)插入DNA分子(如质粒,病毒等),从而实现DNA分子体外重组,产生新的自然界从未有过的充组DNA分子,然后再将之引入特定的宿主细胞进行扩增和表达,使宿主细胞获得新的遗传性状的技术。

自从1982年重组人胰岛素问世以来,基因工程药物已成为生物技术药物的核心,并在危害人类健康的重大疾病防治方面发挥了重大作用。

据统计,至今已有近千种生物技术药物分别处于不同的研究开发阶段(指已完成临床前工作的),这些药物主要针对肿瘤,感染性疾病,AIDS/HIV感染及相关疾病,心脑血管栓塞性疾病,神经系统性疾病,呼吸系统疾病,自身免疫性疾病,糖尿病,器官移植等。

如果将正在开发的生物药物按分子类别归类,则主要包括抗体,疫苗,基因治疗,白介素,干扰素,生长因子,重组可溶性受体,反义药物和人生长激素等。

基因工程的基本过程是将一个含有目的基因的DNA片段经体外操作与载体连接,并转入宿主细胞,使之扩增,表达的过程,典型的步骤有目的基因的制备,载体的选择,目的基因与载体的连接,重组DNA的转化/转染,重组子的筛选和鉴定,表达产物的鉴定,工程菌(细胞)的大规模培养,表达产物的分离和纯化。

因此,要完成一个基因工程细胞的构建工作至少必须有:靶基因,载体,工具酶,宿主细胞。

背景介绍烟酰胺单核苷酸(NMN)是人体内合成 NAD 的重要前体,通过转化为 NAD 来发挥其生理功能,预防多种疾病。

烟酰胺核糖激酶能够以烟酰胺核糖为底物,在ATP的作用下催化其成为烟酰胺单核苷酸。

在两种酶法合成烟酰胺单核苷酸的途径中,以烟酰胺核糖为底物,烟酰胺核糖激酶在ATP的作用下催化其成为NMN(烟酰胺单核苷酸)。

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